品牌 QIAGEN凱杰 貨號 12381 規格 5T 供貨周期 現貨 主要用途 無內毒素宏量質粒提取試劑盒 應用領域 醫療衛生,化工,生物產業,制藥/生物制藥
Qiagen 12381 無內毒素宏量質粒提取試劑盒
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Qiagen 無內毒素宏量質粒提取試劑盒 -常備現貨
QIAGEN 作為創新市場和技術的領dao 者，憑借強大的樣本制備和分析技術，實現各種生物樣本內容物的高品質純化、分析。我們致力于幫助客戶在生命科學研究、應用檢測、制藥、和分子診斷領域獲得成功和突破性進展。由此讓生活的改善成為可能。我們秉承市場、客戶、病患至上的理念，不斷推進多領域的創新和發展，充分發揮我們的樣本制備和分析技術專長。
Qiagen 12381 無內毒素宏量質粒提取試劑盒 EndoFree Plasmid Mega Kit 5T ，產品簡介：
產品品牌：Qiagen
產品貨號：12381
產品名稱：無內毒素宏量質粒提取試劑盒
產品規格：5T
Qiagen 無內毒素宏量質粒提取試劑盒 -常備現貨
Qiagen 12381 無內毒素宏量質粒提取試劑盒 EndoFree Plasmid Mega Kit 5T ，產品說明：
特征
達到小于 0.1 EU/ μg DNA
綜合內毒素去除
高拷貝質粒 DNA 的高產量
LyseBlue 可實現最佳裂解和最大 DNA 產量
產品詳情
無內切質粒試劑盒提供基于陰離子交換的快速無內毒素質粒 DNA 純化。QIA 過濾器濾芯可通過過濾快速清除裂解物。純化的DNA 純度超過2 x CsCl 梯度離心獲得的純度，適用于高級轉染級應用。EndoFree 質粒緩沖液組合可用于制備10 mega 或5 giga 轉染級質粒或cosmid DNA 制劑。
Performance
EndoFree 質粒試劑盒將高效的內毒素去除步驟集成到質粒純化程序中——無需額外的提取或親和柱來去除脂多糖。細菌裂解物通過QIAfilterMega-Giga 或Maxi 濾芯過濾進行清除，質粒DNA 在含有陰離子交換樹脂的重力流QIAGEN jian端上純化。從培養物中純化 DNA 可獲得高達 10 mg （giga ）、2.5 mg （兆）和 500 μg （最大）的純化 DNA （培養體積取決于質粒拷貝數、插入片段大小、宿主菌株和培養基）。純化的DNA 不含內毒素（<0.1 EU/ μg DNA ）。
對于低拷貝質粒和cosmid 的純化，由于所需的培養體積大且QIAfilter 超千兆質粒試劑盒的容量有限，因此EndoFree 質粒Mega 試劑盒是比EndoFree Giga 質粒試劑盒更好的選擇。
無內切質粒試劑盒可去除裂解步驟中釋放的細菌內毒素，并影響DNA 轉染到原代細胞和敏感培養細胞中。從EndoFree 質粒試劑盒獲得的無內毒素DNA 非常適合在轉染中獲得可重復且可靠的結果。QIAGEN 超純無內毒素DNA 也適用于基因治療研究和其他敏感應用。
* 原代兔胃壁細胞轉染用按所示方法制備的pEGFP-N2 （CLONTECH ）。使用Effectene 轉染試劑進行轉染。數據表示表達GFP 的細胞百分比，通過對轉染后48 小時的綠色熒光細胞數量進行評分來確定。每種純化方法的轉染效率代表來自6 種以上不同DNA 制備的9 至2 個重復培養皿的平均效率。（數據由美國佐治亞州奧古斯塔佐治亞醫學院分子醫學和遺傳學系 C. Chew 和 J. Parente 提供。
Principle
純化質粒DNA 中的內毒素污染水平取決于所使用的純化方法。二氧化硅漿液純化的DNA 表現出ji高的內毒素水平。QIAGEN 、QIAfilter 和HiSpeed 質粒試劑盒以及2x CsCl 超速離心可產生非常純的DNA ，內毒素水平相對較低。EndoFree 質粒試劑盒包括一個集成的內毒素去除步驟，可產生含有 <0.1 EU/ μg 質粒 DNA 的質粒 DNA 。
QIAfilter 試劑盒以QIAfilter 、HiSpeed 和EndoFree 質粒試劑盒形式提供，是特殊的過濾裝置，旨在取代細菌細胞堿性裂解后的離心。QIAfilter 濾芯可wan 全去除SDS 沉淀物并清除細菌裂解物，所需時間僅為離心所需時間的一小部分，從而將質粒純化時間縮短多達1 小時。QIAfilter 超級千兆濾芯在室內真空下運行，以最小的努力有效地清除大量細菌裂解物（請注意，瓶子不包括在套件中）。QIAfilter Maxi 濾芯具有注射器形式，通過將液體推入過濾器，可在幾秒鐘內清除裂解物。
QIAGEN-tips 中du 特的陰離子交換樹脂專為核酸純化而開發。其zhuo 越的分離特性使DNA 純度等于或優于連續兩輪CsCl 梯度離心獲得的DNA 純度。預包裝的QIAGEN 吸頭通過重力流運行，永bu 干涸，最大限度地減少了質粒制備所需的手動操作時間。整個QIAGEN 質粒純化系統避免使用苯fen 、氯仿、溴化乙錠和氯化銫等有毒物質，最大限度地減少對用戶和環境的危害。
內毒素，也稱為脂多糖或LPS ，是大腸桿菌等革蘭氏陰性細菌的細胞膜成分。內毒素在質粒純化的裂解步驟中釋放，并顯著降低內毒素敏感細胞系的轉染效率。此外，內毒素可以通過與DNA 競爭“游離"轉染試劑來影響轉染實驗中質粒DNA 的攝取。內毒素還會誘導巨噬細胞和B 細胞等免疫細胞中免疫應答的非特異性激活，從而導致對轉染結果的誤解。這些反應包括誘導蛋白質和脂質的合成，如IL-1 和前列腺素。總體而言，內毒素是轉染實驗設置中不可控的變量，會影響結果和結果的可重復性，使其難以比較和解釋。在基因治療研究中，內毒素可以通過引起內毒性休克綜合征和補體級聯反應的激活來干擾。
Procedure
細菌細胞在堿性條件下裂解，并使用QIAfilter 濾芯清除粗裂解物。在此階段，將內毒素去除緩沖液添加到過濾后的裂解物中，在冰上孵育。然后將澄清的裂解物加載到陰離子交換jian端，質粒DNA 在適當的低鹽和pH 條件下選擇性結合。通過中鹽洗滌除去RNA 、蛋白質、代謝物和其他低分子量雜質，并在高鹽緩沖液中洗脫超純質粒DNA 。DNA 通過異丙醇沉淀濃縮和脫鹽，并通過離心收集。
Applications
使用無內切質粒試劑盒純化的DNA 適用于任何敏感應用，包括：
轉染，包括原代細胞、敏感細胞和懸浮細胞
基因治療研究
基因沉默
注射
產品訂購信息：
Qiagen 12381 無內毒素宏量質粒提取試劑盒 EndoFree Plasmid Mega Kit 5T
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